Λύσεις — Εργαστήριο Κεφ. 3 · Παρασκευή Αραιώσεων (σελ. 160) – ΚΛΙΝΙΚΗ ΒΙΟΧΗΜΕΙΑ Ι Β΄ ΕΠΑΛ

Λύσεις — Εργαστήριο Κεφ. 3 · Παρασκευή Αραιώσεων (σελ. 160)

Απαντήσεις στις 2 ασκήσεις (με υποερωτήματα) του βιβλίου.

Διαδοχικές αραιώσεις

Ερώτηση: 1. Να παρασκευάσετε τις παρακάτω διαδοχικές αραιώσεις: α. 1/16, 1/32, 1/64, 1/128, σε συνολικό όγκο 2 mL. β. 1/2, 1/4, 1/8, σε συνολικό όγκο διαλύματος 1 mL. γ. 1/10, 1/100, 1/1000, σε όγκο διαλύματος 5 mL. δ. 1/10, 1/20, 1/40, 1/80, με τελικό όγκο διαλύματος 5 mL.

Λύση:

• α) 1/16→1/128 (2 mL, υποδιπλάσιες): 1ο σωλ.: 0,125 mL ουσία + 1,875 mL αραιωτικό (=1/16). Βάζουμε 1 mL αραιωτικό στα σωλ. 2,3,4· μεταφέρουμε διαδοχικά 1 mL (1ο→2ο→3ο→4ο) → 1/32, 1/64, 1/128 (πετάμε 1 mL από το 4ο).
• β) 1/2→1/8 (1 mL): 1ο: 0,5 mL ουσία + 0,5 mL αραιωτικό (=1/2). Στα σωλ. 2,3 βάζουμε 0,5 mL αραιωτικό· μεταφέρουμε 0,5 mL διαδοχικά → 1/4, 1/8.
• γ) 1/10→1/1000 (5 mL, υποδεκαπλάσιες): 1ο: 0,5 mL ουσία + 4,5 mL αραιωτικό (=1/10). Στα σωλ. 2,3 βάζουμε 4,5 mL αραιωτικό· μεταφέρουμε 0,5 mL διαδοχικά → 1/100, 1/1000.
• δ) 1/10 και μετά υποδιπλάσιες (5 mL): 1ο: 0,5 mL ουσία + 4,5 mL αραιωτικό (=1/10). Στα σωλ. 2,3,4 βάζουμε 2,5 mL αραιωτικό· μεταφέρουμε 2,5 mL διαδοχικά → 1/20, 1/40, 1/80.

Απάντηση: Κάθε σειρά ξεκινά με την 1η αραίωση και συνεχίζει με μεταφορά (μισού όγκου για υποδιπλάσιες, 0,5 mL για υποδεκαπλάσιες), με ανάμιξη κάθε φορά.

Πρόσεξε:

• Από το τελευταίο σωληνάριο κάθε σειράς αφαιρούμε και απορρίπτουμε τον όγκο που μεταφέρεται (1 mL, 0,5 mL, 0,5 mL και 2,5 mL αντίστοιχα). Πριν από κάθε μεταφορά χρειάζεται καλή ανάμιξη (ομογενοποίηση).

Ενδιάμεσες αραιώσεις

Ερώτηση: 2. Να παρασκευάσετε τις παρακάτω ενδιάμεσες αραιώσεις: α. 1/20, 1/30, 1/40. β. 1/10, 1/15, 1/20, 1/25, 1/30, 1/35.

Λύση:

• Οι ενδιάμεσες δεν είναι διαδοχικές: κάθε αραίωση 1/n παρασκευάζεται ανεξάρτητα από την ίδια αρχική ουσία — 1 μέρος αρχικής ουσίας + (n−1) μέρη αραιωτικό· η ποσότητα του αραιωτικού αυξάνεται από σωληνάριο σε σωληνάριο.
• α) 1/20 → 1 μέρος + 19 μέρη αραιωτικό· 1/30 → 1 + 29· 1/40 → 1 + 39.
• β) 1/10 → 1 + 9· 1/15 → 1 + 14· 1/20 → 1 + 19· 1/25 → 1 + 24· 1/30 → 1 + 29· 1/35 → 1 + 34 μέρη αραιωτικό.
• Π.χ. με 0,1 mL δείγματος σε κάθε σωληνάριο: α) 1/20 → + 1,9 mL, 1/30 → + 2,9 mL, 1/40 → + 3,9 mL αραιωτικού· β) + 0,9, 1,4, 1,9, 2,4, 2,9 και 3,4 mL αντίστοιχα. (Όταν δεν δίνεται τελικός όγκος, το βιβλίο προτείνει να αυξάνεται ο τελικός όγκος από σωληνάριο σε σωληνάριο.)

Απάντηση: Για κάθε τίτλο 1/n: 1 μέρος ουσία + (n−1) μέρη αραιωτικό, ξεχωριστά για την καθεμία.

Πρόσεξε:

• Στις ενδιάμεσες κάθε αραίωση γίνεται από την ΑΡΧΙΚΗ ουσία (όχι μεταφορά από την προηγούμενη).
• Αλλάζουμε πιπέττα από σωληνάριο σε σωληνάριο, για να αποφύγουμε λάθη.